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技術文章

怎么選購BioRad伯樂電穿孔系統電極杯?

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電極杯是電穿孔實驗中的核心耗材,其選擇直接關系到實驗的成敗。選購時,您需要依次考慮以下四個關鍵因素:


一、選購伯樂電極被核心要素

電極杯兩極之間的精確距離(以毫米計)決定了電擊時產生的電場強度(E, V/cm)。電場強度(E) = 電壓(V) / 間隙(cm)。因此,間隙是選擇電極杯最關鍵的參數,它必須與您的實驗 protocol 和細胞類型相匹配。


二、常見間隙及適用場景

1、間隙大小:1 mm

適用細胞類型:細菌、酵母、部分懸浮哺乳動物細胞

特點及應用:常用。適用于大多數細菌轉化(如大腸桿菌),所需電壓較低。

2、間隙大?。? mm

哺乳動物細胞(貼壁或懸浮)、植物原生質體

非常常用。適用于多種真核細胞轉染,提供了電場強度和細胞存活率之間較好的平衡。

3、間隙大小:4 mm

非常脆弱的細胞,如植物原生質體、某些昆蟲細胞

需要較低電場強度時使用。所需電壓較高,但電流較小,熱效應較低。

簡單總結:小間隙(如1mm)用于小細胞(細菌)和高電場強度;大間隙(如2mm, 4mm)用于大而脆弱的細胞和較低電場強度。


三、材質與工藝 - 影響實驗一致性和安全性

1、電極材質:伯樂的電極杯通常采用高純度的鋁電極。鋁能提供優異的導電性和一致的電場分布,是標準選擇。確保電極光滑、無劃痕。

2、杯體材質:通常為無菌、生物清潔級的透明聚苯乙烯,便于觀察樣品。

3、工藝質量:選擇無縫一體成型的杯體。有縫的廉價替代品容易在電擊時發生泄漏或電弧放電,導致實驗失敗甚至損壞電穿孔儀。


四、如何根據您的系統和實驗進行選擇

1、確認您的電穿孔儀型號:

伯樂常見的電穿孔系統如 Gene Pulser Xcell、MicroPulser、Gene Pulser II 等,都使用標準規格的電極杯(長寬高一致)。您主要需要選對間隙,而無需擔心兼容性問題。這些儀器的電極槽設計就是為這種標準杯服務的。

2、參考已有Protocol:

如果您是重復經典實驗(如大腸桿菌DH5α的轉化),文獻或實驗室的既定protocol中會直接指定使用 1 mm 間隙的電極杯。

如果是轉染一種新細胞,首先查閱文獻中類似細胞使用的參數(電壓、電容、電阻)和電極杯間隙。伯樂也提供了大量針對不同細胞類型的推薦protocol。

3、進行條件優化:

如果找不到參考,您需要進行優化實驗。通常的方法是固定脈沖時間(或電容/電阻)和DNA用量,使用同一間隙(如2mm)的電極杯,在不同電壓下進行測試,找到轉換效率高且細胞死亡率低的“甜蜜點"。


五、選購總結與清單

在購買前,請核對以下清單:

間隙(Gap):我的實驗對象需要____ mm的電極杯?(細菌選1mm,哺乳動物細胞常用2mm)

無菌性:我的實驗需要無菌包裝嗎?(是/否)

酶潔度:我的核酸樣品需要無DNase/RNase認證嗎?(是/否)

包裝數量:我需要單支包裝還是多支包裝?

品牌與質量:我是否選擇伯樂原廠或口碑好的高質量兼容品牌以確保結果一致性和可靠性?(強烈建議初學者和重要實驗使用原廠產品)

TEL:18016231680

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