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BioRad伯樂T100梯度PCR儀作為一款高性能的PCR設備,其運行需要以下耗材和試劑,具體分類如下:
一、核心耗材
1、PCR管/板
0.2mL薄壁PCR管:需與儀器適配(如BioRad推薦規格),確保熱傳導效率。
8聯管或96孔PCR板:兼容T100的模塊規格,注意是否需使用透明或半透明蓋膜。
封板膜/ adhesive seals:用于96孔板密封,防止蒸發和污染。
2、離心管/吸頭
微量移液器吸頭(無核酸酶):用于試劑分裝,避免交叉污染。
1.5mL離心管:配制主混合液(Master Mix)時使用。
二、必需試劑
1、PCR反應組分
DNA模板:待擴增的核酸樣本。
引物(Primers):特異性引物對,設計需符合實驗需求。
dNTPs:脫氧核苷酸三磷酸(dATP、dTTP、dCTP、dGTP),提供合成原料。
DNA聚合酶:如Taq酶、高保真酶(如BioRad的iProof™),需匹配實驗類型(常規/高保真)。
MgCl?溶液(若酶需要):部分聚合酶需額外添加鎂離子。
緩沖液(Buffer):通常隨酶提供,含pH穩定劑和鹽離子。
2、添加劑(可選)
增強劑:如BSA、DMSO、甜菜堿(Betaine),用于復雜模板(如GC-rich序列)。
染料:如SYBR Green(qPCR時使用),若需實時監測擴增。
三、輔助耗材
1、清潔與維護
無水乙醇或異丙醇:清潔PCR儀熱蓋和模塊。
無絨拭布:擦拭模塊,避免殘留。
去離子水:校準溫度時可能需要(參考儀器手冊)。
2、防污染工具
RNase/DNase-free離心管和吸頭:防止核酸降解。
紫外線燈或核酸清除劑(如DNA-OFF™):處理潛在污染。
四、注意事項
1、兼容性驗證:確保耗材(如PCR板)與T100的加熱塊規格匹配,避免熱傳導不均。
2、無核酸酶環境:所有耗材需為無核酸酶級別(如認證的PCR Clean產品)。
3、梯度PCR優化:若使用梯度功能,需驗證不同退火溫度對試劑的影響。